GC—ECD测定当归等10种药食两用中药材中有机氯残留量

对照品出峰顺序为α-BHC、PCNB、γ-BHC、β-BHC、δ-BHC、p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT，所得空白溶剂和混合对照品色谱图见图1、图2。

时间（min）

图1 空白溶剂色谱图

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液的制备 分别取上述各对照品液（100 μg/ml）各0.5 ml至10 ml量瓶中，加入石油醚（60～90℃）稀释至刻度，即得浓度为5 μg/ml的混合对照品储备液。取混合对照品储备液0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 ml至5 ml量瓶中，分别加石油醚（60～90℃）稀释至刻度，即得0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 μg/ml的溶液。

2.2.2 样品溶液的制备 取供试品于60℃干燥4 h，粉碎成细粉，过二号筛，取约2 g，置100 ml锥形瓶中，加水20 ml浸泡过夜，加丙酮40 ml，称定重量，超声处理30 min，放冷，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠6 g，加二氯甲烷30 ml，称定重量，超声处理15 min，放冷，用二氯甲烷补足减失的重量，静置使分层。将有机相迅速移入装有无水硫酸钠的100 ml锥形瓶中，放置4 h。取35 ml，于40℃水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚（60～90℃）如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（60～90℃）溶解并转移至10 ml具塞刻度离心管中，加石油醚（60～90℃）稀释至5 ml，小心加入硫酸1 ml，振摇1 min，3000 r/min离心10 min，取上清液2 ml，置具刻度的浓缩瓶中，连接旋转蒸发器，40℃将溶液浓缩至适量，稀释至1 ml，即得。

2.3 线性关系考察

精密量取上述0.1、0.5、1.0、2.5、5.0 μg/ml各农药混合对照品溶液，依“2.1”色谱条件分析，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得到相应回归方程（表1）。

2.4 检出限

配制一系列低浓度溶液进样，以信噪比（S/N=3）测得BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB检出限分别为0.2、0.2、0.2、0.4、0.2、0.2、0.6、0.6、0.4 ng/g。

2.5 重复性试验

取当归（甘肃1）样品5份，按“2.2.2”项下操作制备待测液，按“2.1”色谱条件测定，得到BHC（α-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDD、o，p′-DDT）峰面积值的RSD分别为1.7%、1.0%、2.0%、1.5%，表明方法重复性良好。

2.6 精密度试验

精密吸取1.0 μg/ml混合对照液1 μl，连续进样5次，按“2.1”色谱条件测定，得到BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB峰面积值的RSD分别为1.9%、0.7%、0.4%、1.2%、0.3%、0.4%、0.6%、1.0%、0.8%，表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性试验

精密吸取1.0 μg/ml混合对照液1 μl，连续在1、8、16、32、48 h进样，按“2.1”色谱条件测定，得到BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p′-DDE、p，p′-DDD、o，p′-DDT、p，p′-DDT）、PCNB峰面积值的RSD分别为1.2%、1.0%、0.5%、1.0%、1.1%、1.5%、1.9%、1.0%、0.6%，表明样品溶液在48 h内稳定。

2.8 回收率试验

取当归样品9份，每份约2.0 g，精密称定，分3个水平添加混和对照品溶液，每水平重复3次，混匀，自然晾干，按“2.1”项下操作测定，所得结果扣除样品中各农药残留量，计算加样回收率，结果见表2。

2.9 样品测定

准确称取各药材样品，按“2.2.2”项下操作制备待测液，按“2.1”色谱条件测定，结果见表3。

3 讨论

3.1 色谱及实验条件优化

本实验分别选用SE-54、HP-1、Rtx-1701、DB-1等色谱柱进行比较，最后选用Rtx-1701对各BHC、DDT异构体分离度适中，峰型较好，且最低检出限值相对最低，满足本次有机氯残留量痕量检测要求。本实验有机试剂丙酮、石油醚、二氯甲烷均选用农残级，如用分析纯易对测定产生干扰，尤其是丙酮、石油醚。有机相减压浓缩时，水浴温度不能高于40℃，且减压浓缩务必至近干，避免待测成分损失。

3.2 检测结果

实验结果显示，30批药食两用药材均不同程度地被检出有机氯残留量，尤以当归、党参等根及根茎类药材总含量相对较高，花类药材相对偏低，在2015年版《中国药典》四部中，规定了药材、饮片及制剂中有机氯、有机磷以及拟除虫菊酯类共3类37种农药残留的检测方法，但《中国药典》2015年版一部正文中仅对甘草、黄芪、人参、西洋参、人参茎叶总皂苷、人参总皂苷中有机氯残留量做了限量规定。参考黄芪、甘草药典有机氯残留限量标准[17-19]，总BHC：0.2 mg/kg；总DDT：0.2 mg/kg；PCNB：0.1 mg/kg，本次实验结果均没有超出限度范围，对于当归、党参、金银花等药食两用药材，因其使用的直接性、广泛性和多样化，期望能严格控制其农药残留，尽快建立农药残留限度标准。

3.3小结及建议

随着我国健康产业发展的迫切需求，中药材尤其是药食两用药材必将成为人们日常疾病预防及保健养生的重要原材料，其质量安全性直接关乎人们生活质量和生命健康，随着世界经济一体化发展进程的加快，中药必然走向国际市场参与竞争，其安全性问题成为关注焦点，同时亦是中医中药全球化发展瓶颈，其农药残留问题必须得到有效控制才足以提高中药材的国际信誉和档次，才能使中医药事业更加健康地向前发展。

针对药食两用药材的农药残留问题，药材生产实施规范化质量管理（GAP）必须严格建立配套的标准、法规，加大监督、处罚力度，对药材生产基地的选择标准、使用农药的种类及使用农药的人员和设备情况、中药加工和仓储的条件、中药中农药残留量的检测方法和限量规定以及监督措施等建立详尽的法规性文件，并采取处罚措施等各种手段保证GAP得以贯彻实施，保证“绿色药材”的生产。对于已污染的土壤如何采用合适的方法降低其农药残留量[20-22]，如以微生物技术投菌法生物修复降解有机氯农药等，从土壤源头来降低和消除种植中药材的农药残留污染问题，改善种植生态环境。

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（收稿日期：2016-01-10 本文编辑：王红双）

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