胃癌患者血清VEGF—C、Ang—2的表达及临床意义

[摘要] 目的 研究胃癌患者血清中血管内皮生长因子-C （VEGF-C）、血管生成素-2（Ang-2）的表达变化及其与胃癌的临床病理特征的关系，探讨VEGF-C与Ang-2在胃癌中的相互关系。 方法 收集120例胃癌患者及49例健康者（对照组）血清，采用酶联免疫吸附技术（ELISA）检测血清中VEGF-C、Ang-2水平。 结果 胃癌患者血清中VEGF-C、Ang-2含量较对照组均明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；VEGF-C表达水平升高与胃癌淋巴结转移（P<0.01）、浸润深度（P<0.05）、TNM分期（P<0.01）相关；Ang-2表达水平升高与胃癌淋巴结转移（P<0.01）、浸润深度（P<0.01）、TNM分期（P<0.01）相关；VEGF-C与Ang-2表达成正相关关系（r=0.478，P<0.05）。 结论 血清中VEGF-C、Ang-2可作为胃癌生物学指标，两者联合可能成为判断胃癌淋巴结转移及预后的重要指标。

[关键词] 胃癌；血管内皮生长因子-C；血管生成素-2；酶联免疫吸附实验；淋巴结转移

[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（c）-0012-03

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率位于消化系统肿瘤首位。胃癌的浸润和转移是导致患者死亡和预后较差的重要原因。而胃癌作为实体肿瘤，其浸润转移依赖于肿瘤血管生成[1]。目前研究认为肿瘤的血管生成是一系列血管生长刺激因子和抑制因子作用失衡的结果。血管内皮生长因子-C（vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C）属于VEGF家族成员之一，是特异性的淋巴管生成因子，被认为与肿瘤病理过程中的淋巴管生成密切相关[2]。研究认为VEGF-C是通过自分泌和旁分泌两种机制同时促进胃癌的进展[3]。血管生成素-2（angiopoietin-2，Ang-2）是近年来发现的与血管生成及血管成熟有关的因子，Ang-2与Ang-1能够竞争性结合内皮细胞Tie-2受体，诱导内皮细胞分裂移位，促进新生血管生长[4]。近来研究发现，Ang-2的促进肿瘤血管生成作用可能与VEGF因子的表达密切相关。本研究应用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测胃癌患者血清中VEGF-C及Ang-2蛋白的表达情况，探讨其与胃癌发生的关系。

1资料与方法

1.1 临床资料

选择2010年9月～2012年4月本院确诊的胃癌住院患者120例，所有病例均经病理确诊，采用2010年国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会（UICC/AJCC）TNM分期标准，Ⅰ期20例，Ⅱ期26例，Ⅲ期38例，Ⅳ期36例；排除冠心病、高血压及糖尿病等慢性疾病及胃转移癌；其中，男75例，女45例，年龄34～79岁，中位年龄48岁。选择同期本院体检人员中的健康者49例对照组，其中，男30例，女19例，年龄32～59岁，中位年龄为42.5岁。两组年龄、性别比较，差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 样本收集及检测

所有被检患者术前均未进行放、化疗，取清晨空腹静脉血3～4 ml，非抗凝管保存，室温静置0.5 h后2000 r/min离心分离血清，-80℃保存待测；血清中VEGF-C及Ang-2蛋白的含量按照ELISA试剂盒说明书检测，在波长450 nm下读取光密度值并计算VEGF-C、Ang-2的浓度。所有试剂盒均购自美国ADL公司。

1.3 统计学方法

应用SPSS 16.0统计学软件处理数据，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，采用t检验和Pearson相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 两组血清VEGF-C和Ang-2水平的比较

胃癌患者血清中VEGF-C、Ang-2含量较对照组明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。血清VEGF-C和Ang-2呈正相关（r=0.478，P<0.05）。

2.2 胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2与临床病理特征的相关性

血清中VEGF-C含量与胃癌患者淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关（P<0.05），与性别、年龄、有无远处转移无关（P>0.05）；胃癌患者血清Ang-2含量与淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关（P<0.05），与性别、年龄、有无远处转移无关（P>0.05）（表2）。

3 讨论

肿瘤的生长依赖于新生血管且与肿瘤的发展密切相关，新生肿瘤血管不仅供给肿瘤细胞充足的营养及氧气，其内皮细胞还通过旁分泌作用及产生肿瘤生长启动因子直接促进肿瘤细胞生长[5]。VEGF-C是目前发现的强力促血管形成因子之一，也是肿瘤细胞分泌的促血管形成的关键因子，VEGF-C可直接作用于血管内皮细胞并刺激有丝分裂，改变血管内皮细胞通透性，为新生血管提供基质和支持，从而促进肿瘤细胞的生长和转移[1]。Hachisuka等[6]研究表明，胃癌组织VEGF-C表达与淋巴结转移密切相关，可用于胃癌患者术前对淋巴结转移的判断。赵金伟[7]等研究发现，胃癌患者术前血清VEGF-C水平较健康人群明显升高，且胃癌患者血清VEGF-C水平与组织VEGF-C表达无关。本研究发现，胃癌组血清中VEGF-C含量明显高于对照组，且有淋巴结转移的VEGF-C水平明显高于无淋巴结转移者，浸及浆膜层者VEGF-C水平明显高于未浸及浆膜层者，TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者VEGF-C水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者，以上结果提示VEGF-C可能参与胃癌浸润及转移，有望成为评价胃癌淋巴结转移及预后的有效指标。

血管生成素是与血管生成有关的一个家族，包括Ang-1、Ang-2、Ang-3和Ang-4 4个成员。Ang-2基因位于第8号染色体短臂（8p23），表达分泌型蛋白。Ang-2与受体Tie-2结合，使后者不能磷酸化，从而阻断血管稳定信号，引起血管不稳定[4]。Ang-2可促进肿瘤性血管新生，刺激血管内皮始祖细胞增殖，诱导内皮细胞蛋白酶的产生；直接分泌信号肽启动肿瘤早期血管形成信号，参与肿瘤发生发展[8]。本研究发现，胃癌患者血清中Ang-2含量明显升高，与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关，提示Ang-2可能通过调控肿瘤血管生成，参与胃癌的淋巴结转移及浸润。Ang-2生物学功能取决于细胞内环境和其他血管再生因子的相互作用。Ley[9]等研究发现在VEGF、bFGF存在时Ang-2能够促进内皮细胞增殖，缺乏时Ang-2又可诱导细胞凋亡。Engin[4]等发现Ang-2可能由于胞质内容物不同而呈现促进或抑制血管生成的作用，胃癌中Ang-2而不是Ang-1与Tie-2的结合及其在胞质内浓度与肿瘤血管生成相关。Ang-2伴随VEGF的表达上调，促进新生血管生成；当Ang-2强表达时，局部缺氧得到缓解，VEGF表达水平降低，导致血管的退化[10]。张真真等[11]发现，Ang-2/Ang-1的比值可能是决定胃癌血管生成和肿瘤生长的最终因素，推测在胃癌血管生成中血管生成素及其受体系统的调节作用是以Ang-2的作用为主导的。

目前临床对于VEGF-C与Ang-2在胃癌中关系的研究比较少，本研究证实在胃癌患者血清中，VEGF-C与Ang-2表达均上调，且两者呈正相关关系，提示胃癌中这两种因子可能共表达并共同参与肿瘤血管形成这一病理过程。但具体的分子调控机制尚需进一步实验证实。随着对VEGF-C及Ang-2研究的深入，VEGF-C和Ang-2可望成为肿瘤临床治疗的新靶点。

[参考文献]

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[4] Engin H，Ustündag Y，Ozel Tekin I，et al.Plasma concentrations of Ang-1，Ang-2 and Tie-2 in gastric cancer[J].Eur Cytokine Netw，2012， 23（1）：21-24.

[5] Belugali Nataraj N，Salimath BP.Crosstalk between VEGF and novel angiogenic protein regulates tumor angiogenesis and contributes to aggressiveness of breast carcinoma[J].Cell Signal，2013，25（1）：277-294.

[6] Hachisuka T，Narikiyo M，Yamada Y，et al.High lymphatic vessel density correlates with overexpression of VEGF-C in gastric cancer[J].Oncol Rep，2005，13（4）：733-737.

[7] 赵金伟.胃癌患者血清VEGF-C和VEGF-A的水平变化及VEGF-C在胃癌组织中的表达[J].吉林大学学报：医学版，2006，32（3）：1214-1216.

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[9] Ley CD，Olsen MW，Lund EL，et al. Angiogenic synergy of bFGF and VEGF is antagonized by Angiopoietin-2 in a modified in vivo matrigel assay[J].Microvasc Res，2004，68（3）：161-168.

[10] Danza K，Pilato B，Lacalamita R，et al.Angiogenetic axis angiopoietins/Tie2 and VEGF in familial breast cancer[J].Eur J Hum Genet，2013，21（8）：824-830.

[11] 张真真.促血管生成素及其受体的异常表达与胃癌血管生成的关系[J].中华肿瘤杂志，2006，28（4）：280-284.

（收稿日期：2013-03-28 本文编辑：魏玉坡）

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